Анализы на туберкулез у детей и взрослых: какие сдавать, методы диагностики, где можно сдать

Особенности подготовки и проведения процедуры у мужчин

Как уже было сказано, мазок ПЦР у мужчин берут из мочеиспускательного канала. Чтобы получить необходимый биоматериал, врач-уролог использует специальный тонкий зонд и вводит его на глубину 3-4 см. Процесс взятия мазка ПЦР на уреаплазму, гонорею и другие распространенные возбудители может принести боль и значительный дискомфорт. Но придется потерпеть. Нередко у мужчин мазок на ПЦР вызывает жжение и зуд, поэтому перед введением зонда с целью уменьшить дискомфортные ощущения пациентам рекомендуют массажировать уретру. Поэтапно процедура взятия соскоба выглядит так:

Мужчина освобождает половые органы от одежды.
Прежде чем вводить зонд в уретру, врач надевает одноразовые перчатки и осуществляет визуальный осмотр кожных покровов, слизистых оболочек на предмет высыпаний.
Затем с помощью инструмента уролог берет мазок методом ПЦР из мочеиспускательного канала. Зонд вводится на 3-4 см в глубину уретры и несколько раз прокручивается.
После извлечения зонда врач делает мазок на предметном стекле, которое впоследствии и отправит в лабораторию.

Помимо болезненных ощущений, процедура взятия соскоба вызывает у мужчин психологический дискомфорт. У тех, кто посещает уролога регулярно, подобных проблем не возникает. Кроме того, имеет значение правильная подготовка к мазку ПЦР. Она заключается в соблюдении следующих условий:

За несколько дней до анализа мужчине нужно отказаться от интимных связей.
Мазок берут в утренние часы.
Перед процедурой мужчине не нужно проводить гигиену половых органов, лучше всего принять душ с вечера.
За три часа до взятия образца биоматериала нельзя посещать туалет.

Так же, как и у женщин, сильнодействующие препараты могут исказить результат анализа на полимеразную цепную реакцию.

Интерпретация результатов ПЦР анализа

При определении наличия ДНК (РНК) полимеразная цепная реакция считается положительной, и это точно демонстрирует наличие возбудителя.

Для диагностики вируса иммунодефицита человека и гепатитов В и С используют ПЦР с определением концентрации ДНК (РНК).

Для ДНК высокой считается концентрация 1,0 x 105 копи на такие инфекции как герпес, цитомегаловирус, ВИЧ и гепатиты, а также токсоплазмоз.

Количественная оценка ПЦР или количественный анализ экспрессии генов говорит об их активности. В результате экспрессии генов образуются определенные белки. которые и считаются в рамках количественной ПЦР в реальном времени. По результату этого исследования врач судит об инфекционной нагрузке и активности возбудителей.

При диагностике ИППП используют несколько диагностических исследований. ПЦР позволяет довольно точно определить наличие определённого возбудителя уже в продромальный период развития инфекции.

Когда симптомы больше напоминают простуду, чем конкретное заболевание. Интересно также оценить напряженность иммунного ответа макроорганизма. Для этого назначаются серологические исследования ИФА, РПГА, РИФ и прочие.

Серология показывает, сколько антител и к какому именно антигену сформировалось, какая стадия заболевания наблюдается. Существует понятие «титр антител». То есть их количество, характеризующее напряженность, то есть выраженность иммунитета. Случается, что ответы разных исследований противоречат друг другу.

ПЦР является реакцией проверки, то есть именно по её положительному результату судят о наличии возбудителя. Например, если ПЦР положительна, а мазок на флору отрицательный.

Мы считаем, что в последнем случае в материал просто не попало нужного количества микроорганизмов. Или они не окрасились по разным причинам. Если ПЦР положительна, а серологические пробы отрицательны, то организм человека не вырабатывает иммунного ответа на возбудителя.

Наблюдается состояние иммуносупрессии, что бывает:

при ВИЧ
при приёме специальных лекарственных препаратов после трансплантации
при лечении аутоиммунных заболеваний
в период выздоровления после тяжёлой болезни
при истощении или тяжелой хронической усталости

Если ПЦР отрицательна, а серологические пробы положительны, то нужно смотреть на фракцию иммуноглобулинов. IgM характерен для острой фазы течения заболевания при первичном заражении.

В такой ситуации врач может повторить забор материала. Или ориентироваться по точному, но длительно выполняемому культуральному методу (посев культуры возбудителя на питательные среды).

Высокий титр Ig A или IgG могут свидетельствовать о хронической инфекции в стадии обострения. А их низкие титры – просто о том, что пациент перенёс данное заболевание. Именно поэтому серологические пробы не используют для контроля эффективности лечения. В частности, проводить ПЦР нужно после определенного промежутка.

Цена анализа зависит от материала, использованного для ПЦР, и колеблется от 350 до 1200 рублей.

При необходимости сдать ПЦР анализы обращайтесь к автору этой статьи – венерологу в Москве с многолетним опытом работы.

Области применения анализа

В настоящее время в медицине и криминалистике, а также для клонирования генов и установления родственных связей применяют более десятка разновидностей амплификации. В ежедневной практике кровь на ПЦР назначают медицинские специалисты:

педиатр;
гинеколог;
уролог;
дерматовенеролог;
инфекционист;
фтизиатр;
пульмонолог.

Генно-молекулярная диагностика успешно применяется в неонатологии. С помощью полимеразной цепной реакции выявляют возможное заражение младенцев внутриутробно и сразу после появления на свет. Для детей с риском инфицирования анализ проводят в первые 48 часов после рождения и повторно в возрасте 3-6 месяцев.

Кроме инфекционных заболеваний, Рolymerase Сhain Reaction помогает диагностировать наследственные аномалии и мутации. В перинатальный период методом ПЦР у будущего малыша можно обнаружить:

гемофилию – нарушение свертываемости крови;
болезнь Хантера – патологии обменных процессов;
мусковидоз – нарушение внешнесекреторной функции желез;
нервно-мышечную миодистрофию Дюшенна-Беккера;
первичный иммунодефицит;
синдром Альпорта – патологию почек.

PCR используют для определения мутантных генов и их РНК-продуктов в диагностике онкологических заболеваний. Высокая чувствительность молекулярного метода обеспечивает выявление онкопатологий в доклинической стадии, когда очаг опухоли не превышает 0,01 см3 в размерах.

По обнаруженным онкогенам, биологическим канцерогенам и антионкогенам диагностируют исходную стадию:

онкогематологических болезней (рака крови и лимфатической системы);
злокачественных образований молочных желез;
аденокарциномы толстой кишки;
меланомы;
рака ротоглотки;
наследственных форм рака.

Высокой онкогенностью обладают штаммы 16, 18, 31, 33, 35 ВПЧ (вируса папилломы человека). В 50% случаев вызывают карциному шейки матки у женщин – раковую опухоль эпителиальных клеток. Обнаружение неопластических клеток в доклинической стадии рака значительно повышает шансы на успешное лечение болезни.

Особую ценность ПЦР имеет для Службы крови. Метод позволяет определить заражение гепатитами, ВИЧ, сифилисом в бессимптомный инкубационный период. На этой стадии иммунная система еще не продуцирует антитела к возбудителям, и выявить заболевания с помощью серологических исследований невозможно.

Проверка донорской крови ПЦР предупреждает возможное инфицирование реципиента

Сбор материала для диагностики

Для проведения анализа используется любой материал, содержащий ДНК:

Соскоб из уретры, цервикального канала, дыхательных путей, зева, конъюнктивы. Материал берется с поверхности слизистой с помощью особого ершика и помещается в стерильную емкость. В пробу не должна попасть кровь пациента. ПЦР соскоб используют для выявления урогенитальных, пульмонологических, офтальмологических и лор-инфекций.
Мокрота – ее отбирают в стерильную герметичную емкость для проведения анализа на туберкулез и другие респираторные инфекции.
Моча – в стерильную емкость отбирают 50 мл утренней мочи. Анализ можно сдать для выявления урогенитальных инфекций.
Кровь, плазма, сыворотка – кровь на ПЦР сдается из вены в объеме 1-1,5 мл на голодный желудок. Образец хранят при +4°С в течение 24 часов.
Биологические жидкости (слюна, амниотическая, спинномозговая, внутрисуставная, плевральная, простатическая). Забор производят с помощью пункции.
Биоптат. Отбирают его из органов ЖКТ для определения Helicobacter pylori или из других органов для идентификации онкологических заболеваний.

Что делать перед исследованием

Подготовка к ПЦР зависит от вида отбираемого материала. Например, перед ПЦР крови необходимо:

есть не позже 8-10 часов до забора;
не курить за 2 часа, не пить алкоголь за 1-2 дня;
не принимать препараты за 24 часа;
не волноваться, избегать физических нагрузок.

Чтобы при соскобе из урогенитального тракта получить достоверный результат, нельзя:

вступать в половые отношения позже 2 дней до анализа;
проводить спринцевание;
мочиться позже 3 часов до процедуры;
использовать химические ПАВ с антибактериальными свойствами для обмывания гениталий.

Как берут материал на анализ методом ПЦР у мужчин

Если кровь, другие биологические жидкости и биоптаты отбираются без учета гендерных отличий, то при заборе материала из половых и мочевыводящих путей особенности мужского и женского организма учитываются. Соскоб из уретры для проведения ПЦР у мужчин делают так:

с помощью мыла и воды производят туалет половых органов;
наружный покров органа обрабатывают физраствором и подсушивают салфеткой;
осторожно вводят стерильный зонд на 2-4 см в канал;
вращательным движением производят забор биоматериала и помещают его в транспортный раствор в стерильном контейнере, отдают в лабораторию.

Делать соскоб нужно осторожно, чтобы не повредить слизистую, имеющую морфофункциональные нарушения, обусловленные имеющимся заболеванием мочеполовой системы

Сбор материала у женщин

Для подтверждения патологий женской репродуктивной системы соскоб делают со слизистой влагалища или цервикального канала. Для отбора материала применяют специальный инструмент в виде щеточки или ватную палочку. Предварительно удаляют слизь. Полученный образец помещают в стерильный сосуд с физраствором для транспортировки в лабораторию.

Плюсы и минусы ПЦР

При отражении плюсов ПЦР следует отметить:

чувствительность. Как говорилось выше, даже единичный агент, оставленный возбудителем, позволяет обнаружить инфекцию на ее ранней стадии или если она протекает скрытно;
широкий спектр. Например, ПЦР 6 позволяет 1 исследованием выявить целых 6 возбудителей;
точность. Ложные результаты при данном методе исследования имеют место быть, но их количество сведено к минимуму;
скорость. Как правило, пациент уже на следующий день может забрать готовый результат ПЦР исследования.

Минусы:

стоимость. ПЦР-исследование не включено в список исследований в системе ОМС. Дорогое высокоточное оборудование требует оплаты своей работы;
требования к соблюдению техники исследования и к профессионализму сотрудников;
требования к подготовке.

— Ð²Ð²ÐµÐ´ÐµÐ½Ð¸Ðµ Ð¼ÑÑÐ°ÑÐ¸Ð¸;

— ÑÑÑÐ°Ð½Ð¾Ð²Ð»ÐµÐ½Ð¸Ðµ Ð¾ÑÑÐ¾Ð²ÑÑÐ²Ð° Ð¸ Ñ. Ð¿.

Что такое ПЦР диагностика инфекций

Большинство людей хотя бы раз в жизни сдают анализы на инфекции методом ПЦР. Но мало кто знает, что это такое и в чём состоит суть исследования.

Диагностика инфекций методом ПЦР основана на обнаружении ДНК или РНК патогенного микроорганизма. Он может быть выявлен в любом клиническом материале, полученном инвазивным или неинвазивным способом. В нем выявляется генетический материал возбудителя, который многократно копируется. Определяется определенный фрагмент генетического кода, соответствующий эталону.

Если он присутствует в клиническом материале, результат будет положительным.

Преимущества ПЦР диагностики половых инфекций:

высокая точность и информативность;
минимальный риск ложноположительного или ложноотрицательного результата;
с помощью ПЦР диагностика инфекций может быть проведена в любом клиническом материале;
можно обнаружить практически любых возбудителей;
исследование проводится быстро – результаты можно получить уже через несколько часов после сдачи анализа.

В настоящее время ПЦР диагностика инфекций – один из основных методов выявления большинства венерических заболеваний.

Анализ ПЦР инфекции с количественной оценкой

Чаще всего врачи назначают качественные анализы ПЦР на инфекции. То есть, результат может быть либо положительный, либо отрицательный. Но в ряде случаев требуется количественное исследование.

Оно отличается тем, что помимо факта наличия возбудителя в структурах мочеполовой системы, определяется его концентрация в клиническом материале.

Количественная ПЦР на инфекции необходима в таких случаях:

при диагностике инфекций, которые считаются условно-патогенными (в таком случае они могут вызывать воспалительные процессы только при чрезмерном увеличении популяции бактерий);
для оценки динамики течения патологического процесса и эффективности терапии;
для оценки прогноза заболевания, определения риска осложнений, подбора адекватной терапии.

Больно ли сдавать мазок анализ ПЦР инфекции

Большинство анализов безболезненны или доставляют пациенту минимум дискомфорта. Сама по себе ПЦР никак не может вызвать болевых ощущений, потому что проводится в лаборатории, вдали от пациента.

Неприятной может быть лишь процедура забора клинического материала. А он может быть разным. Очевидно, что если на анализ берется моча или эякулят, то анализ не будет болезненным. В то же время если исследуется ликвор, соскоб из уретры, секрет предстательной железы, то забор биоматериала будет в той или иной степени неприятным. Чаще всего для диагностики венерических инфекций берется соскоб клеток уретры. Эта процедура обычно неприятна, но в нашей клинике она проводится безболезненно.

В чем отличия мазка и крови анализ ПЦР инфекции

Как уже было сказано, для диагностики может использоваться разный клинический материал. В мазке из уретры определяются те возбудители, которые присутствуют в структурах мочеиспускательного канала. Но они там есть не всегда. Поэтому часто приходится исследовать другой биоматериал, например, кровь.

Вот какие инфекции можно сдать в мазке:

анализ ПЦР инфекции бактериальные – гонорея, хламидиоз, уреаплазмоз, микоплазмоз;
трихомониаз;
вирусы – ВПЧ, герпес;
грибки – кандида.

Вот какие инфекции можно сдать в крови:

анализ ПЦР инфекции вирусные – ВИЧ, вирусные гепатиты, герпес, цитомегаловирус;
бактериальные патологии – сифилис (редко);
любые венерические патологии в случае их генерализации (гонорея, кандидоз).

На практике чаще всего ПЦР крови проводится при подозрении на вирусные инфекции, которые могут не выделяться во внешнюю среду через уретру.

Преимущества и недостатки метода

ПЦР диагностика (что это такое, рассказано выше) была подробно описана Кери Муллисом в 1983 году. С тех пор метод пользуется огромной популярностью в лабораторной практике.

Основными преимуществами такого вида исследования является:

универсальность;
быстрота результатов;
высокая вероятность получения достоверных результатов;
специфичность;
многообразие заболеваний, которые можно определить.

Универсальность метода ПЦР состоит в возможности использования любых физиологических материалов человека. Даже одного волоса достаточно для анализа.

Процесс обработки данных, благодаря автоматизации, может занять несколько часов. Специфичность состоит в выделении определённого ДНК-фрагмента, характерного для конкретного возбудителя. С помощью ПЦР-анализа могут быть диагностированы многие заболевания, как в стадии обострения, так и в стадии скрытого течения.

Но, несмотря на огромное количество достоинств, метод диагностики ПЦР имеет и недостатки:

вероятность ложноположительных результатов;
высокая чувствительность;
изменчивость микроорганизмов.

Основной недостаток метода состоит в неспособности ПЦР отличить живые микроорганизмы от погибших. Как правило, это относится к ситуации, когда следует оценить успешность проводимого лечения. В этом случае, если болезнь пролечили, то мёртвые клетки ещё некоторое время находятся в организме человека и для полного его обновления необходимо некоторое время от 4 до 6 недель.

Высокая чувствительность является преимуществом и в то же время недостатком. Некоторые микроорганизмы в малом количестве присутствуют в организме. Поэтому в этом случае этот метод диагностики не является информативным, и рекомендуется применять другие типы исследования.

Любые микроорганизмы способны мутировать. И даже несмотря на то, что в процессе амплификации используется специфичный фрагмент, который наименее подвержен изменениям, он все равно может приобретать мутации и становиться невидимым для тест-системы. Такая ситуация объясняет тот факт, что различные системы лабораторных анализов могут показывать абсолютно разные результаты.

Откуда и как забирается биоматериал для мазка на ПЦР

Материалом для ПЦР-диагностики могут быть различные биологические материалы. Информативность процедуры зависит от правильности выполнения анализа и взятия пробы. Как правило, биологическую субстанцию забирают из тех мест, где преимущественно накапливается возбудитель. Исходя из этого, выборка биоматериалов проводится следующим образом.

Моча отбирается на анализ при подозрении на инфекционное поражение мочеполовой системы.
Мокрота используется для идентификации туберкулёза, респираторных форм венерических заболеваний, таких как хламидиоз и микоплазмоз.
Кровь забирается при диагностике ВИЧ, гепатитов различных типологий, герпетических инфекций.
Соскобы со слизистых оболочек обычно используются для выявления заболеваний, которые передаются половым путём (ЗППП), а именно кандидоза, микоплазмоза, трихомониаза, хламидиоза, гонореи.
Другие биологические жидкости (суставная и спинномозговая, слюна и так далее) забираются по определённым показаниям.

У мужчин

У мужчин, у которых имеются подозрения на венерические инфекции, соскоб берётся с поверхности половых органов либо из урогенитального тракта.

У женщин

В аналогичной ситуации для женщин наиболее информативным будет мазок со стенок влагалища, цервикального канала и шейки матки.

Порядок взятия биоматериалов других видов (кровь, моча и так далее) у мужчин и женщин не различается.

Нужна ли подготовка к сдаче анализа

Метод полимеразной цепной реакции – наиболее точный и информативный лабораторный тест. Однако это правило действует только при соблюдении техники проведения исследования.

Для мужчин и женщин существуют определённые правила подготовки и сдачи биологического материала к ПЦР-анализу. Рассмотрим основные из них.

Правила, действующие для мужчин:

Если метод ПЦР направлен на выявление урогенитальных инфекций, должна соблюдаться повышенная гигиена за несколько суток до анализа.
Важно отсутствие половых контактов за последние 48 часов.
Необходимо отказаться от мочеиспускания за три часа до исследования.

Регламент подготовки для женщины:

Во время интимной гигиены запрещается использовать мыло с антибиотиками и другими противомикробными компонентами.
Действует запрет на приём антибиотиков перорально за несколько недель до исследования.
Запрещается сдавать анализ в первые дни менструального цикла.
Вводится ограничение на половые контакты за двое суток до исследования.

Достоверность и информативность результата зависят от их чистоты биологических материалов. Только в этом случае анализ будет объективным. Если для исследования необходима моча, то биологическая жидкость сдаётся в стерильный контейнер накануне исследования. Если говорить о крови – её необходимо сдавать натощак. Мазки берут с чистой поверхности, которая не была обработана никакими лекарственными средствами. Взятие всех анализов должно выполняться стерильными инструментами с соблюдением правил асептики.

Достоинства ПЦР

Ни один из методов исследования не способен найти возбудителя непосредственно в гене, содержащемся в исследуемых материалах. ПЦР – это максимально точный и достоверный анализ на венерические заболевания и латентные вирусы в организме. В отличие от иных способов диагностики, анализ полимерной цепной реакции имеет ряд преимуществ:

он нацелен на обнаружение возбудителя инфекции;
является универсальным, поскольку позволяет выявлять сразу несколько типов инфекционных агентов;
при этом достаточно использования только одного биологического образца пациента;
обладает сверхчувствительностью, за счет чего вероятность возможных перекрестных реакций равняется нулю.

В сравнении с методом бактериологического посева, мазок на ПЦР считается самым надежным и быстрым диагностическим способом. Сама процедура лабораторной диагностики не занимает более четырех часов. Для получения результата бакпосева требуется не менее семи дней. Суть этого метода состоит в следующем: образец биоматериала помещают в благоприятную среду и наблюдают за активностью возбудителей, если таковые обнаруживаются, на протяжении всего периода исследования.

Суть исследования ПЦР

Полимеразная цепная реакция (ПЦР) считается одним из надежных способов определения наличия бактерий и вирусов в организме человека. Исследование проводят с помощью биоматериалов — слюны, выделений, крови, мокроты и иных субстанций организма. Взятые на анализ материалы смешивают с реактором, который выявляет наличие чужеродных ДНК в составе выделений человека.

Специальные ферменты провоцируют цепную реакцию роста молекул ДНК микроорганизмов, с помощью которой появляется возможность их обнаружения. Помимо выявления присутствия возбудителя в тканях организма, мазок позволяет установить вид и количество находящихся бактерий.

Преимущество данного метода исследования заключается в возможности обнаружить вирус даже по частичным фрагментам его ДНК в выделениях человека — цепная реакция выстраивает молекулы ДНК полностью. Другими преимуществами ПЦР метода являются:

быстрый результат, в сравнении с бактериальным посевом и иными методами, — ответ готов в тот же день после сдачи анализов;
возможность исследования любого биоматериала — крови, слюны, выделений из матки и т.д;
возможность определения вида вируса, точность диагностики.

Помимо преимуществ, метод имеет и свои недочеты. К ним относится:

вероятность неточного результата после курса антибиотиков — анализ обнаружит мертвые структуры бактерий и покажет их наличие в организме;
невозможность выявления гарднереллеза — небольшое количество бактерий постоянно присутствует во влагалище;
метод не в состоянии определить мутацию вирусов, способность видоизменяться.

Общие правила для сдачи анализов

Чтобы исследование биоматериала было максимально точным, выполняйте данные правила:

кровь сдают с утра натощак, за сутки до забора плазмы нельзя кушать сладкое, соленое и пить спиртное;
урину сдают рано утром, первую порцию;
мазок эпителия слизистых половых органов берут после воздержания от интимных контактов в течение трое суток;
мазки не сдают во время критических дней, только на третьи сутки после менструации.

Обычно для исследования микроорганизмов берут биоматериал соответствующих болезни слизистых оболочек и выделений:

при заболевании мочеполовой системы — забор урины;
при заболевании легких/бронхов — мокроту;
ИППП заболевания — исследуют эпителий соответствующих слизистых оболочек;
при подозрении на гепатит — исследуют кровь пациента;
при диагностике хеликобактерной инфекции — используют биоптаты.

Исследование туберкулеза внутренних органов проводят с помощью полимеразной цепной реакции. Палочки Коха могут поражать не только ткань легких, но и кишечник, кожу, почки и другие внутренние органы.

Методы диагностики туберкулеза: от аппаратных подходов до лабораторных анализов