Что такое ДНК-вакцины и с чем их едят?

Первичные симптомы меланомы

Первичные симптомы меланомы зависит от стадии данного заболевания. А предусматривает меланома стадии от начальной до 4-й. В целом же признаки наличия данного злокачественного образования проявляются в характерном росте невуса (родинки), который далее может расширяться по поверхности кожного покрова и даже выходить за пределы кожи в виде узелковых разрастаний. Более того, невус становится черного цвета, однако местами со светлыми или же красноватыми участками. Также характерные признаки недоброкачественности невуса – это его асимметричность, а также наличие зуда, шелушения, болезненности, язв и даже кровоточивости.

По своему типу меланома бывает поверхностно-распространяющейся (поражается поверхность кожи), узловой (по типу узла, который возвышается над кожей), акрально-лентигинозной (в виде пятна, располагающегося на подошвах\ладонях\ногтевом ложе), а также лентиго меланома (по типу пятна с нечеткими и неровными границами наряду с неравномерным оттенком).

С чего начать лечение

Лечить любое заболевание необходимо начинать с правильной диагностики. Маленького пациента, в первую очередь, направляют на консультацию к неврологу. После осмотра специалист по необходимости назначает обследования:

• ЭЭГ;
• электромиография;
• МРТ;
• электронейрография;
• трансканальная магнитная стимуляция.

После установления диагноза ребенок отправляется к логопеду, который проводит специальные логопедические пробы. Они позволяют установить степень заболевания, форму. В дальнейшем к процессу подключаются психоневролог, дефектолог.

Различают четыре степени заболевания:

• 1 степень – диагноз устанавливается только посредством специальных тестов компетентным специалистом;
• 2 степень – речь понятна для восприятия, но имеет небольшие дефекты;
• 3 степень – речь понимают только близкие;
• 4 степень – речь непонятна для восприятия или отсутствует.

В зависимости от степени расстройства специалист назначает лечение, проводит коррекционные мероприятия.

Меланома и немеланомные раки кожи: распространение и метастазирование

Как уже было упомянуто, меланома характеризуется ранним и агрессивным метастазированием. Видимая поверхностная опухоль — лишь часть глубоко расположенного новообразования, быстро достигающего кровеносных сосудов, по которым распространяется (метастазирует) в другие части тела. Чаще всего меланома дает гематогенные метастазы в головной мозг, метастазы в печень, метастазы в легкие. Распространяясь по лимфатическим сосудам, клетки меланомы образуют метастазы в регионарных лимфатических узлах.

Базалиома, по мере своего роста проходит ряд этапов: узловой может смениться поверхностными вариантами, при которых целостность кожи не нарушена; далее новообразование изъязвляется, после чего возможен переход в инфильтративную (проникающую в соседние ткани) форму. И если метастазы базалиомы практически не встречаются, то ее инфильтративный рост чреват значительным разрушением окружающих и расположенных под опухолью тканей. Происходит разрушение сосудов, мышц, хрящей и даже костей, что, учитывая частую локализацию на коже головы, может привести к разрушению костей черепа, хрящей носа и уха и т.д. Причем активный переход от язвенной к инфильтративной форме этого вида рака кожи может начаться по истечению даже десятков лет.

Плоскоклеточный рак кожи постоянно прогрессирует, течение заболевания и его формы могут значительно отличаться: от медленного роста до агрессивного распространения через кожу на мышцы, хрящи и кости. При этом изначальная динамика может оказаться ошибочной: после фазы медленного роста новообразование может превратиться в агрессивно прорастающую в соседствующие ткани опухоль, метастазировавшую в лимфоузлы, кости, легкие. Метастазы в лимфатических узлах чаще отмечаются при локализации плоскоклеточного рака на коже рук, ног и уха.

Симптомы заболевания

Беспигментная меланома — это узелок на коже:

• округлый или овальный;
• плотноэластичный на ощупь;
• «мясистый»;
• телесного, розоватого, коричневатого или синюшно-красноватого цвета;
• с поверхностью, на которой нет обычного кожного рисунка;
• может иметь ножку;
• не болит, но может зудеть.

В отличие от пигментной меланомы, опухоль из меланоцитов без пигмента чаще всего более симметричная, она менее склонна к отеку и образованию вокруг нее небольших сосочков-сателлитов.

Растут «бесцветные» меланомы быстро — вырастая с 2-3 мм до 2-3 см всего за 2-4 месяца. Такой «узелок» может быть бугристым, на нем можно обнаружить язвочки или похожие на маленькие папилломы образования.

Самое опасное, что рост ахроматической меланомы отмечается не только вверх, но и вглубь кожи. Оно склонно к распаду. Поэтому на поздних стадиях опухоль выглядит как язва, края которой плотные и приподнятые, а на дне видны мелкие сосочки.

Как распознать беспигментную меланому на начальных стадиях?

Первые симптомы беспигментной меланомы — возникновение на коже (чистой или в области пигментных образований) розового пятна. Такое пятно увеличивается в течение нескольких недель/месяцев, отличается повышенной рыхлостью и кровоточивостью.

Отдельные виды меланомы без пигмента выглядят как постепенно увеличивающаяся бородавка или папиллома. Другие беспигментные меланомы — как появление на ногте коричневой полоски, которая распространяется на кончик пальца.

На начальных стадиях беспигментные опухоли не болят и не зудят, поэтому на них редко обращают внимание.

Службы доставки

Способам введения ДНК-вакцин в организм уделяется не меньше внимания, чем созданию самих конструкций, так как от этого зависит успех иммунизации в целом. Поэтому разработаны различные, порой весьма хитроумные, методы доставки таких вакцин в организм.

Рисунок 4. Одноразовый генный пистолет компании PowderJect. а — внешний вид; б — в разрезе. Рисунок с сайта

Самый простой — это парентеральный способ введения, который заключается в инъекции ДНК-вакцин в солевом растворе (внутримышечно, внутрикожно). При этом бόльшая часть ДНК поступает в межклеточное пространство и только потом включается в клетки.

Использование генного пистолета. Для этого ДНК фиксируют на микроскопических золотых гранулах (около 1–2 мкм), а затем с помощью устройства, приводимого в действие сжатым гелием, гранулы «выстреливают» непосредственно внутрь клеток (рис. 4). Для данного способа доставки требуется значительно меньшее количество вводимого материала, чем для внутримышечной инъекции. Так, для инъекции мышам нужно 10-100 мкг препарата, а с использованием генного пистолета достаточно 0,1-1 мкг.

Электропорация — техника, которая с использованием электрических импульсов позволяет формировать поры в клеточной мембране и доставлять ДНК непосредственно в клетки.

Микроконтейнеры из полиматериалов. Московские ученые, например, создали пористую микросферу из карбоната кальция, покрытую несколькими слоями полисахаридов, в которую упаковывается молекула ДНК. Если микросферы в полимерной оболочке поместить в подкисленный раствор, карбонат кальция внутри растворится и уйдет через полимерную мембрану. Внутри останется только ДНК, подлежащая транспортировке. Подобных микроконтейнеров для доставки ДНК разработано не так много. Есть зарубежные аналоги, в которых оболочка капсулы выполнена из полимолочной кислоты. На их основе создают вакцины против гепатита и даже СПИДа. Средний диаметр микрокапсул для доставки ДНК-вакцин всего 1–2 микрона. Такие микрокапсулы можно ввести подкожно или даже в кровь. Если в микрочастицу вместе с ДНК или лекарством поместить фермент, расщепляющий оболочку капсулы изнутри, то высвобождением лекарства можно управлять: чем меньше фермента, тем медленнее рушится оболочка.

Липосомные носители обеспечивают высокую эффективность доставки при внутривенном введении, при этом экспрессия целевых генов значительно возрастает, так как осуществляется во многих органах, и особенно в селезенке.

ДНК-вакцины можно вводить перорально с использованием бактериальных носителей. Для этих целей применяются, например, модифицированные бактерии Shigella flexneri с делецией в гене asd. Мутантные бактерии растут in vitro на среде с диаминопимелиновой кислотой и, проникая в эукариотические клетки, не размножаются в них, так как отсутствует упомянутая кислота, а продуцируют закодированные в плазмиде антигены [6]. Для перорального введения создан вектор на основе ослабленного штамма Salmonella, который способен к самоуничтожению в организме через определенный период времени после выполнения иммунизационных задач. Для этого бактерию модифицировали таким образом, что ее выживание стало зависеть от наличия искусственных сахаров, не встречающихся в условиях организма. После того как в клетках, зараженных генно-инженерным штаммом Salmonella, заканчивается запас специфического сахара, поставляемого вместе с вакциной, бактерии не способны сохранить целостность своих клеточных стенок, что приводит к их гибели [11].

Была предложена оригинальная система доставки ДНК с помощью «теней» — неживых клеток грамотрицательных бактерий, лишенных цитоплазматического содержимого, но сохраняющих морфологию и антигенные структуры, включая адгезивные факторы. «Тени» обладают тропностью к антигенпрезентирующим клеткам макроорганизма и адъювантными свойствами, усиливающими иммунный ответ. Кроме того, в лиофильно-высушенном состоянии препараты «теней» хранятся при комнатной температуре неопределенно долгое время, а их производство дешево [6].

Разработана технология доставки ДНК-вакцин с использованием бактериофагов [12]. В данном случае вакцинная ДНК встраивается в геном вектора-бактериофага, которым затем иммунизируют макроорганизм [13].

Нужно учитывать, что разные методы доставки ДНК-вакцин в организм обеспечивают развитие различных клеточных реакций, при этом важные иммунологические пути могут быть стимулированы или, наоборот, не задействованы в ходе развития защитного ответа. Способы и места введения ДНК-вакцин варьируют для разных видов организмов. Например, уши свиньи — отличное место для инъекций, а вот введение препарата в уши овец или коров неэффективно.